一、温度：对酶促反应速度的影响很大，表现为双重作用：
1、与非酶的化学反应相同，当温度升高，活化分子数增多，酶促反应速度加快；
2、由于酶是蛋白质，随着温度升高而使酶逐步变性，即通过酶活力的减少而降低酶的反应速度。
二、pH值：影响酶促反应速度的原因：
1、环境过酸、过碱会影响酶蛋白构象，使酶本身变性失活。
2、pH影响酶分子侧链上极性基团的解离，改变它们的带电状态，从而使酶活性中心的结构发生变化。
3、pH能影响底物分子的解离。
三、酶的浓度：在有足够底物而又不受其它因素的影响的情况下，酶促反应速率与酶浓度成正比。当底物分子浓度足够时，酶分子越多，底物转化的速度越快。
四、底物浓度：在生化反应中，若酶的浓度为定值，底物的起始浓度较低时，酶促反应速度随底物浓度的增加而增加。
五、激活剂对酶促反应速度的影响：许多酶只有当某一种适当的激活剂存在时，才表现出催化活性或强化其催化活性。