《大明王朝1566》中闫妮演的是李妃。十五岁进入裕王府，为裕王朱载坖生第三子朱翊钧，进而由都人宫女升为侧妃。裕王登基后被封贵妃，地位仅次于陈皇后。万历元年1573年，朱翊钧即位，是为明神宗，为母亲李氏上尊号为慈圣皇太后。六年三月，加尊号曰慈圣宣文皇太后。十年，加尊号曰慈圣宣文明肃皇太后。十二年，与陈太后一同谒山陵。二十九年，加尊号曰慈圣宣文明肃贞寿端献皇太后。三十四年，加尊号曰慈圣宣文明肃贞寿端献恭熹皇太后。四十二年二月崩，上尊谥曰孝定贞纯钦仁端肃弼天祚圣皇后，合葬昭陵，别祀崇先殿。
在古装喜剧《武林外传》中因佟湘玉一角而一举成名的女演员闫妮，这次在《大明王朝》中扮演李妃。闫妮说，李妃是古装版的‘超女’，因为李妃是从平民家庭里通过海选成为皇妃的，虽然是女流之辈，但是她非常聪明，在错综复杂的宫廷中能够立足，这不仅仅是流露于她表面的威仪，而是她内心深处的力量，而剧中李妃虽然戏不多，但是论到重要和精彩程度，则一点都不逊色于男性角色。
在拍摄《大明王朝》的过程中，闫妮印象最深的无疑是第一集中李妃生皇子的那一幕，当时天气非常冷，在拍摄的过程中为了造成满头大汗的样子，用水将她全身喷湿了，让她冻得不行，脑子里面完全一片空白。拍完这场之后，导演叫了几声，她才回过神来，自己是在拍戏。